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=原菌种的保藏= 原菌种的保藏在啤酒工厂尤为受到重视,多设专人负责。可采用几种保藏方法,以防止出现问题影响生产的需要。 ===固体斜面保藏=== 这是一种把分离培养的纯种酵母接种到麦汁琼脂斜面培养基上,生成菌落后加以保藏的方法。麦汁琼脂培养基在生产上经常被使用,另外尚有MYPG琼脂培养基也被普遍使用,其配制方法是:取用3g麦汁浸出物、3g[[http://baike.baidu.com/item/%E9%85%B5%E6%AF%8D%E6%B5%B8%E8%86%8F 酵母浸膏]]、5g蛋白胨、10g葡萄糖、20g琼脂,加少许无菌水并加热溶解,而后加入无菌水使其成为1000ml,分装试管内成为斜面备用。 将欲保藏的啤酒酵母接种在麦汁琼脂培养基或者MYPG琼脂培养基上,置于22~25℃保温箱中培养2~3天,待酵母繁殖成菌落,经检查无杂菌污染且生长整齐后,即于冰箱中保藏,或放在低温度的酵母培养室和贮酒室中保藏,其温度以4℃为宜,温度过高容易使菌体衰老死亡而不利保藏,但温度也不可低于4℃或接近0℃,否则很可能诱发酵母形成孢子。酵母在保藏期间,每年应移植3~4次。 以此方法保藏酵母菌中,由于培养基营养丰富,容易使酵母细胞衰退,且保藏时间较短;有时由于培养基水分蒸发干燥,可使酵母菌种坏死。为避免培养基水分蒸发,可将试管口用已灭菌的橡皮塞塞紧,或以石蜡封口,或者采用螺旋盖的Mecartney瓶。该方法虽然不适合长期保藏,但由于方法简便,啤酒厂均乐于采用,作为平时使用原菌种的保藏方法。 ===液体培养基保藏=== 将欲保藏的酵母菌种接入10%~12%的无菌麦汁或蔗糖溶液中,在25℃保温培养2~3天,酵母经繁殖、发酵后沉淀,移到4℃冰箱或其他低温处保藏,每隔2个月移植一次,以防活力下降或变异。使用时可倒掉上层清液,再倒入灭菌后的麦汁内培养和接种。该方法由于简单易行,啤酒厂较多采用,菌种在短期内不易变异,但必须在保藏期间严格执行移植工作。 ===液体石蜡保藏=== 将欲保藏的酵母如前法接种于麦汁琼脂斜面培养基上,于22℃~25℃培养2~3天,待长成菌落后,注入已灭菌处理的石蜡中,使其覆盖整个斜面培养基并高于斜面末端1cm,便可防止培养基水分蒸发,隔绝空气。需要移种时,使用移种针直接从液体石蜡覆盖的培养基上,挑取菌落,在试管壁上稍作停靠,去除石蜡后,移入至培养基上即可。 液体石蜡的灭菌可以在烘箱150℃~170℃灭菌1小时,也可以蒸汽0.1MPa灭菌30分钟,然后在120℃烘箱中烤干水分后使用。要求所用液体石蜡不含毒物,一般用化学纯规格。液体石蜡保藏啤酒酵母效果最好,经试验保藏一年后,酵母形态无甚变化,其存活率在80%以上。 =现场使用酵母的保藏= 现场使用的啤酒酵母有两种:一种是种母罐接种用酵母(汉生罐),另一种是泥装酵母。 由于汉生罐不在讨论范围之内,所以在这里不进行介绍。 ===泥装酵母的保藏=== 啤酒厂正常生产所使用的酵母,都是经发酵后回收再利用,从回收到使用这段时间,一定要创造条件保证酵母不被污染、变质。 回收后的泥装酵母,经过筛、洗涤后,浸没于0~2℃的无菌水中,酵母贮藏室室温应该保持在0℃~1℃。每天换水1~3次,换水次数开始时间为1~2次,最多不超过3次,其后每天换水1次,无菌水稳不得高于2℃。这种保藏方法可以维持5~7天。如需延长保藏时间,可将过筛、洗涤后的泥装酵母,进行沉淀,除去上部的浸洗清液至最少程度,而后以现场生产用的10%~12%无菌冷却麦汁或蔗糖溶液,注入酵母泥内,其量约为酵母的2~3倍,使之在0℃~2℃酵母洗涤室内保藏。此法可延长保藏时间3~4周,在使用时倾倒掉上部的清液,加入麦汁轻微震荡后送入发酵容器内使用。此法可保藏大量的泥装酵母。 如以原麦汁添加于泥装酵母内,于0℃~3℃的贮酒罐内保藏,保藏时间可达月余。 ===发酵液保藏=== 从酵母繁殖达到最高峰的发酵液中取出10%,急速冷却至2~4℃,进行保藏,可用于后批麦汁接种。此方法保藏酵母可达2周以上。若在保藏期间严格控制温度,按时供氧,保藏时间可达3周以上。此法可用于露天锥形发酵罐,其发酵旺盛时发酵液酵母细胞数,控制在5×10<sup>6</sup>个/ml以上。 =啤酒酵母的退化及其防治=
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