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啤酒酵母
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===获得合适的酵母细胞===
纯种培养要选用经过实践证明合格可靠的酵母细胞。酵母细胞的分离在高泡阶段完成。根据[http://baike.baidu.com/link?url=KaCaqvvwWi1IQ3qZQNIPp3P0K8kh6Dx8G2U4ZEqPJ-2q-2WwCrLvq1eue9qk5Y4TLMRM7zH-2tx4MRM35tDxP7ph35S1B89BVTMmQICxFWmgAIiM57ssPTuZa_9H7Ss37kkgfTozIZGAGcoU6DILNq 单细胞分离法](即小滴培养法)在显微镜下以小滴形式分离出单个酵母细胞,将许多这样的单个酵母细胞在8~10℃与主酵温度相吻合的情况下进行繁殖培养。接下来可以在显微镜下追踪观察酵母细胞不同阶段的生长情况,并据此对酵母细胞进行挑选。借助无菌滤纸条吸取其中最健壮的酵母菌落,并把它置于5ml无菌麦汁中开始培养,然后逐级扩大培养,最高稀释比例可达1:10.若酵母不立即使用,则可将酵母细胞保存在0~5℃的麦汁琼脂(固体培养基)的斜面培养基上,并注入液体石蜡以防止培养基变干。如此处理后的样品可保存6~9个月(酵母银行)。
===实验室扩培===
将装有酵母菌的5ml麦汁继续用来进行实验室扩培。接下来的酵母繁殖(增殖)过程主要通过倒罐形式不断地将处于高泡期的培养液倒入到更大的容器中来实现(扩大倍数<10),如下图所示
{| class="wikitable"
|容器编号
|1
|2
|3
|-
|容器体积/ml
|10
|100
|1000
|-
|无菌麦汁量/ml
|5
|50
|500
|-
|接种量/ml
|—
|5
|55
|-
|总量/ml
|5
|55
|555
|-
|}
超过10L的容器用金属(不锈钢)制作,被称为卡式罐。卡式罐上采用螺纹密封圈来密封。大多数卡式罐都带有方便运输的手柄、无菌空气过滤器和取样阀以及一根连接至罐底的排空与充注软管,软管自身带有管箍(如下图)。卡式罐及其中的内容物一起被加热灭菌,然后被冷却至接种温度后接入酵母液。大多数卡式罐都有带橡皮膜的接种头,在无菌条件下通过注射器来进行接种操作。接种量为100~200ml。通过取样阀上的无菌空气接头,使无菌空气通过垂直升液管从底部进入麦汁以促进酵母繁殖。若以达到期望的酵母细胞数,则导入经空气过滤器过滤后的压缩空气将酵母液从垂直液管和取样阀中压出。
因为运输的原因,更大麦汁量的扩培工作无法在实验室内进行,因此需要在车间的酵母扩培设备中继续进行扩大培养。
===车间酵母扩培===
===酵母扩培设备===